內(nèi)容簡介:《細(xì)胞生物學(xué)層次化實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)》由南京大學(xué)多年從事細(xì)胞生物學(xué)理論與實(shí)驗(yàn)教學(xué)的教師編寫。共收錄55個(gè)有代表性的細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)，依據(jù)類型、難度、用時(shí)等特點(diǎn)對實(shí)驗(yàn)內(nèi)容進(jìn)行了歸類和編排，分為三章。第一章編寫了22個(gè)基本型實(shí)驗(yàn)，涉及細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)觀察及組成顯示，細(xì)胞計(jì)數(shù)，細(xì)胞生理，細(xì)胞分裂，細(xì)胞裂解及效果檢測，細(xì)胞器的分離及細(xì)胞融合；第二章為21個(gè)綜合型實(shí)驗(yàn)，包括細(xì)胞的分離與分選、細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞增殖及細(xì)胞活力檢測、細(xì)胞黏附與遷移分析、細(xì)胞的激活及信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子檢測、哺乳動(dòng)物細(xì)胞轉(zhuǎn)基因及表達(dá)檢測、細(xì)胞周期調(diào)控及檢測；第三章為12個(gè)開放探索型實(shí)驗(yàn)，涉及細(xì)胞凋亡及脹亡的誘導(dǎo)及檢測、細(xì)胞自噬的誘導(dǎo)及檢測、細(xì)胞衰老的誘導(dǎo)與檢測、細(xì)胞分化的誘導(dǎo)及檢測、小干擾RNA引起的基因沉默、細(xì)胞端粒酶活性檢測。此外，還有附錄介紹常用溶液的配制、腹水瘤小鼠模型的建立和細(xì)胞培養(yǎng)前的準(zhǔn)備工作，并附《細(xì)胞生物學(xué)層次化實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)》部分實(shí)驗(yàn)結(jié)果彩圖。

目錄:目錄
第一章 基本型實(shí)驗(yàn) 1
第一節(jié) 細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)觀察及組成顯示 1
實(shí)驗(yàn)1 血細(xì)胞裝片及涂片的制備及染色觀察 2
實(shí)驗(yàn)2 植物細(xì)胞的葉綠體、線粒體及液泡觀察 6
實(shí)驗(yàn)3 蟾蜍胸骨劍突軟骨細(xì)胞高爾基體的中性紅染色 7
實(shí)驗(yàn)4 馬鈴薯和花生徒手切片的制備及細(xì)胞內(nèi)多糖、脂肪的染色 8
實(shí)驗(yàn)5 孚爾根法顯示細(xì)胞中的DNA 10
實(shí)驗(yàn)6 甲基綠-派洛寧染色法顯示細(xì)胞中的DNA和RNA 11
實(shí)驗(yàn)7 考馬斯亮藍(lán)染色法顯示洋蔥鱗莖內(nèi)表皮及巨噬細(xì)胞的細(xì)胞骨架 13
實(shí)驗(yàn)8 酸性磷酸酶法顯示巨噬細(xì)胞溶酶體 16
實(shí)驗(yàn)9 細(xì)胞中過氧化物酶體的顯示 18
實(shí)驗(yàn)10 酶免疫細(xì)胞化學(xué)法顯示人T細(xì)胞表面CD3分子 19
實(shí)驗(yàn)11 細(xì)胞大小的顯微測量 21
第二節(jié) 細(xì)胞計(jì)數(shù) 23
實(shí)驗(yàn)12 細(xì)胞計(jì)數(shù) 23
第三節(jié) 細(xì)胞生理 25
實(shí)驗(yàn)13 哺乳動(dòng)物紅細(xì)胞膜的通透性檢測 26
實(shí)驗(yàn)14 植物細(xì)胞質(zhì)壁分離現(xiàn)象觀察及質(zhì)壁分離法測定基態(tài)滲透值 27
實(shí)驗(yàn)15 小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬現(xiàn)象觀察及吞噬活性檢測 29
實(shí)驗(yàn)16 臺(tái)盼藍(lán)染料排除法檢測活細(xì)胞比率 32
第四節(jié) 細(xì)胞分裂 33
實(shí)驗(yàn)17 壓片法制備植物組織細(xì)胞分裂標(biāo)本片及分裂各期細(xì)胞特征觀察 34
實(shí)驗(yàn)18 滴片法制備動(dòng)物細(xì)胞分裂標(biāo)本片及細(xì)胞分裂指數(shù)分析 35
第五節(jié) 細(xì)胞裂解及效果檢測 38
實(shí)驗(yàn)19 小鼠腹水瘤細(xì)胞裂解及乳酸脫氫酶活性檢測 39
第六節(jié) 細(xì)胞器的分離 40
實(shí)驗(yàn)20 植物細(xì)胞葉綠體的分離 41
實(shí)驗(yàn)21 動(dòng)物細(xì)胞線粒體的分離 43
第七節(jié) 細(xì)胞融合 45
實(shí)驗(yàn)22 PEG介導(dǎo)的細(xì)胞融合 46
參考及拓展閱讀文獻(xiàn) 47
第二章 綜合型實(shí)驗(yàn) 49
第一節(jié) 細(xì)胞的分離與分選 49
實(shí)驗(yàn)23 密度梯度離心法分離血液單個(gè)核細(xì)胞 50
實(shí)驗(yàn)24 免疫磁珠分選法分離小鼠脾臟CD4+T淋巴細(xì)胞 52
實(shí)驗(yàn)25 T細(xì)胞的免疫熒光標(biāo)記及流式細(xì)胞儀分選 54
第二節(jié) 細(xì)胞培養(yǎng) 56
實(shí)驗(yàn)26 貼壁細(xì)胞的原代培養(yǎng) 58
實(shí)驗(yàn)27 貼壁細(xì)胞的傳代培養(yǎng) 61
實(shí)驗(yàn)28 細(xì)胞凍存與解凍復(fù)蘇 63
實(shí)驗(yàn)29 動(dòng)物外周血細(xì)胞培養(yǎng)及染色體制備 66
第三節(jié) 細(xì)胞增殖及細(xì)胞活力檢測 68
實(shí)驗(yàn)30 MTT比色法檢測細(xì)胞增殖與活力 68
實(shí)驗(yàn)31 CCK-8法檢測細(xì)胞增殖與活力 70
第四節(jié) 細(xì)胞黏附與遷移分析 71
實(shí)驗(yàn)32 腫瘤細(xì)胞黏附能力分析 72
實(shí)驗(yàn)33 檢測腫瘤細(xì)胞侵襲能力的Transwell小室實(shí)驗(yàn) 74
實(shí)驗(yàn)34 腫瘤細(xì)胞遷移的劃痕實(shí)驗(yàn)（wound scratch assay） 75
第五節(jié) 細(xì)胞的激活及信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子檢測 76
實(shí)驗(yàn)35 利用鈣離子熒光探針檢測細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度 77
實(shí)驗(yàn)36 信號(hào)蛋白磷酸化水平檢測 79
實(shí)驗(yàn)37 轉(zhuǎn)錄因子NF-κB活性檢測 82
第六節(jié) 哺乳動(dòng)物細(xì)胞轉(zhuǎn)基因及表達(dá)檢測 84
實(shí)驗(yàn)38 綠色熒光蛋白基因轉(zhuǎn)染體外培養(yǎng)的小鼠成纖維細(xì)胞及表達(dá)檢測 85
第七節(jié) 細(xì)胞周期調(diào)控及檢測 87
實(shí)驗(yàn)39 利用流式細(xì)胞術(shù)分析細(xì)胞周期時(shí)相 88
實(shí)驗(yàn)40 細(xì)胞周期蛋白D1基因轉(zhuǎn)染細(xì)胞及細(xì)胞周期檢測 91
實(shí)驗(yàn)41 胸腺嘧啶脫氧核苷（TdR）雙阻斷法同步化培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞 93
實(shí)驗(yàn)42 秋水仙胺阻抑法分離貼壁培養(yǎng)的哺乳動(dòng)物M期細(xì)胞 95
實(shí)驗(yàn)43 植物細(xì)胞中期同步化誘導(dǎo) 97
參考及拓展閱讀文獻(xiàn) 98
第三章 開放探索型實(shí)驗(yàn) 102
第一節(jié) 細(xì)胞凋亡及脹亡的誘導(dǎo)及檢測 102
實(shí)驗(yàn)44 凋亡細(xì)胞及脹亡細(xì)胞的形態(tài)學(xué)檢測 102
實(shí)驗(yàn)45 AnnexinV-FITC/PI雙染色法檢測凋亡與脹亡細(xì)胞 104
實(shí)驗(yàn)46 凋亡細(xì)胞DNA的電泳檢測 107
實(shí)驗(yàn)47 TUNEL技術(shù)原位檢測凋亡細(xì)胞DNA斷裂 110
第二節(jié) 細(xì)胞自噬的誘導(dǎo)及檢測 113
實(shí)驗(yàn)48 MDC染色法檢測巨噬細(xì)胞自噬現(xiàn)象 114
實(shí)驗(yàn)49 GFP-LC3基因轉(zhuǎn)染法顯示自噬體 115
第三節(jié) 細(xì)胞衰老的誘導(dǎo)與檢測 117
實(shí)驗(yàn)50 細(xì)胞ROS的流式細(xì)胞儀檢測 118
實(shí)驗(yàn)51 H2O2誘導(dǎo)細(xì)胞衰老及胞內(nèi)衰老相關(guān)的β-半乳糖苷酶檢測 120
第四節(jié) 細(xì)胞分化的誘導(dǎo)及檢測 123
實(shí)驗(yàn)52 骨髓造血干細(xì)胞的誘導(dǎo)分化 124
實(shí)驗(yàn)53 視黃酸誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞分化及檢測 128
第五節(jié) 小干擾RNA引起的基因沉默 130
實(shí)驗(yàn)54 RNA干擾沉默綠色熒光蛋白基因 130
第六節(jié) 細(xì)胞端粒酶活性檢測 133
實(shí)驗(yàn)55 腫瘤細(xì)胞的端粒酶活性檢測 133
參考及拓展閱讀文獻(xiàn) 136
附錄一 本書常用溶液配制方法 139
附錄二 腹水瘤小鼠模型建立方法 141
附錄三 細(xì)胞培養(yǎng)前的準(zhǔn)備工作 142